在比格飛序熒光定量PCR儀中，除開未知（U）與標(biāo)準品（S）屬性外，樣本還可設(shè)為NC、PC、NTC、NRT四種。無模板對照（NTC）是僅含反應(yīng)試劑而不加核酸模板的空白反應(yīng)，如同實驗系統(tǒng)的"潔凈度檢測儀"。當(dāng)NTC出現(xiàn)擴增曲線時，表明反應(yīng)體系中存在引物二聚體或環(huán)境污染物，此時整板數(shù)據(jù)應(yīng)作廢。陽性對照（PC）則通過加入已知濃度的目標(biāo)序列標(biāo)準品，驗證反應(yīng)體系的有效性——若PC未擴增，提示試劑失活或程序錯誤，該批次結(jié)果不可采信。陰性對照（NC）采用確認無目標(biāo)序列的樣本（如健康組織DNA），用于識別樣本交叉污染。在RNA檢測中，無逆轉(zhuǎn)錄酶對照（NRT）具有特殊價值：通過省略逆轉(zhuǎn)錄步驟，可檢測RNA樣本中殘留的基因組DNA，避免假陽性結(jié)果。這四類對照如同實驗的"質(zhì)量監(jiān)控網(wǎng)絡(luò)"，缺一不可。